- 石妮;毛亚江;张敬敬;蒋鹏;王迎;
肿瘤转移抑制蛋白(Metastasis suppressor1,Mtss1),又名肿瘤转移消失蛋白(Missing in metastasis,MIM)在小脑神经元发育中受到调控,依次表达两种亚型:包含Src磷酸化位点的广泛表达亚型;含Src磷酸化位点片段经RNA剪接去除的神经元特异亚型.为检测这两种Mtss1亚型的酪氨酸磷酸化水平是否因Src磷酸化位点的去除存在明显区别,制备了灵敏度较高并可特异性沉淀外源和内源表达的Mtss1的兔多克隆抗体,对发育时期与成年大鼠小脑内源Mtss1酪氨酸磷酸化水平进行检测,发现成年后的Mtss1与出生后发育时期的Mtss1均发生明显的酪氨酸磷酸化,表明剪接去除包含有Src磷酸化位点中的神经元特异亚型中,还有其他的酪氨酸残基被磷酸化,提示其他酪氨酸磷酸化激酶信号通路对Mtss1神经元亚型的调控作用.
2010年01期 v.14;No.52 1-5页 [查看摘要][在线阅读][下载 347K] [下载次数：169 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 余荣娇;徐斯凡;
为了探究表皮生长因子(EGF)对体外培养的精原干细胞增殖的调控作用及其作用机制.应用不连续Percoll梯度液和选择性贴壁法分离纯化精原干细胞,c-kit细胞免疫组化鉴定细胞,MTT法研究EGF对精原干细胞增殖的效应,再加入JAK-STAT信号通路特异性抑制剂AG490,探究EGF对精原干细胞增殖作用的可能机制.c-kit细胞免疫组化结果显示分离得到细胞为精原干细胞;MTT结果显示各实验组比对照组细胞数量均有显著增多(P<0.01);与对照组相比,加入AG490组的活细胞数有显著下降(P<0.01).实验结果表明EGF能够促进精原干细胞的增殖,并且可以通过JAK-STAT信号通路起作用.
2010年01期 v.14;No.52 6-9页 [查看摘要][在线阅读][下载 229K] [下载次数：202 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 扶星星;李梨平;黄超洋;李小曼;方芳;陈则;
人类巨细胞病毒在多次传代后,会表现出不同的毒力水平.与临床低传代株Toledo相比,实验室高传代株AD169缺失了19个开放阅读框(ORF).这19个基因被认为是与HCMV致病性最可能相关的一组基因,研究这些基因的多态性对揭示HCMV致病性的遗传基础具有指导意义.UL133基因是这19个ORF中的一个.以临床低传代株Toledo和Merlin为对照,分析了23个临床病毒株UL133基因的遗传多态性.序列分析表明,UL133基因具有一定的多态性,Toledo株、Merlin株与我们分离到的临床株一起可分为3个基因型:G1、G2和G3.G2、G3型毒株均能导致先天性感染.没有发现UL133基因型与患儿临床疾病的必然关联.
2010年01期 v.14;No.52 10-15页 [查看摘要][在线阅读][下载 1463K] [下载次数：159 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 王义军;徐甜;胡翔;向双林;周建林;张健;韩梅;
AP-2β是转录因子AP-2家族中的重要一员.AP-2是一个与哺乳动物的发育、细胞生长、分化、凋亡和肿瘤发生都有密切联系的重要的转录因子家族.最近的研究表明,AP-2能通过与其他蛋白的相互作用来调控AP-2下游基因的转录活性.采用免疫共沉淀结合质谱鉴定的方法筛选与AP-2β相互作用的蛋白.结果筛选到Stomatin like protein2(SLP-2)蛋白可能与AP-2β相互作用.免疫共沉淀实验证实外源过表达和内源的SLP-2蛋白都能与AP-2β蛋白相互作用.而且,细胞免疫荧光实验发现外源表达的Myc-AP-2β蛋白与内源的SLP-2蛋白在MCF-7细胞的胞质中有共定位.此外,免疫印记实验结果表明过表达SLP-2能上调AP-2β的蛋白水平,这就表明SLP-2与AP-2β相互作用后,SLP-2可能使AP-2β蛋白更稳定.这些研究结果为进一步研究这两个基因的功能提供了新的切入点.
2010年01期 v.14;No.52 16-20页 [查看摘要][在线阅读][下载 413K] [下载次数：366 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：2 ] - 张云龙;陈格飞;陈国亮;林森珠;张蒙恩;孟清;
介绍了构建大腹圆蛛Fosmid基因组文库及牵引丝蛋白(MaSp)基因克隆筛选的全过程.采用改良CTAB法提取大片段基因组DNA,通过自主构建的电洗脱核酸回收装置分离回收30～40kbDNA片段,经补平磷酸化、与pCC2FOS载体连接、体外包装和转染EPI300TM-T1R,首次构建了无偏向性的大腹圆蛛Fosmid文库,其滴度为4.5×105cfu/mL,覆盖基因组倍数为10.以α-32P标记寡核苷酸探针对文库进行初步筛选,获得含MaSp基因的12个阳性克隆.该文库符合Fosmid文库的品质要求,为进一步筛选并研究大腹圆蛛MaSp基因序列奠定了基础.
2010年01期 v.14;No.52 21-26页 [查看摘要][在线阅读][下载 450K] [下载次数：227 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：1 ] - 陈国平;胡功铃;胡宗利;李勇;顾峰;
红菜薹是一种不经春化处理就可开花的天然早花突变体.根据已报道的拟南芥和芸薹属植物春化相关基因的保守区域设计引物,通过PCR和RT-PCR方法从红菜薹中克隆得到了4个春化相关的关键基因片段:BrFRI、BrFLC、BrVIN3、BrSOC1,获得BrFRI起始密码子附近的关键序列,其中BrVIN3基因序列为首次报道,含有PHD区关键区域.Northern和半定量RT-PCR表达分析表明:BrFRI的表达不受春化作用的影响,BrFLC受春化作用的抑制,BrVIN3和BrSOC1受春化作用的诱导.
2010年01期 v.14;No.52 27-33页 [查看摘要][在线阅读][下载 1197K] [下载次数：256 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：1 ] - 刘冰;姜业芳;李菁;魏华;鲁扬;
采用水平拉线法调查了小溪国家级自然保护区中树附生苔藓植物的种类,并对其进行了地理成分的分析.研究结果表明:该地区附生苔藓植物共18科26属共43种,其中苔类植物6科6属6种,藓类植物12科20属37种;树附生苔藓植物区系成分以东亚成分为主,其次为热带亚洲成分,再次为旧世界温带成分及温带亚洲成分.
2010年01期 v.14;No.52 34-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 169K] [下载次数：284 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：2 ] - 郭克疾;米小其;邓学建;
应用扫描电镜和透射电镜对挂榜山小鲵(Hynobius guabangshanensis)精子的超微结构进行观察和研究.结果表明:1)挂榜山小鲵的精子形态具有小鲵科精子的共同特征:头部细直、有锥形顶体;颈部短而不明显,尾部细长、有波动膜;2)该种小鲵的精子超微结构具小鲵科物种精子的共同特征,即精子无顶体钩,顶体呈三叶草状,尾部无线粒体,轴纤维粗大呈圆柱状等;3)除精子全长(194.1±7.15μm)在小鲵科物种中属于中等外,挂榜山小鲵和本科其他物种的精子在形态量度学方面差异明显:其头部占全长的比例(22.98%)比其他已知小鲵科的物种都低,尾部占全长的比例(65.79%)比其他小鲵科物种都高.
2010年01期 v.14;No.52 38-43页 [查看摘要][在线阅读][下载 923K] [下载次数：96 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：2 ] - 李新辉;龙勇诚;龙春林;
通过在云南省西北部老君山金丝厂滇金丝猴栖息地设置标准样方,调查该滇金丝猴群栖息地的环境特点,研究表明,金丝厂滇金丝猴群栖息地是以长苞冷杉和毛柱红棕杜鹃为主的亚高山寒温性针叶林,该群落发育较好,高大树木占有较大的比例,林下箭竹密度大.这些特征对该滇金丝猴群的安全和生存起着重要的作用.
2010年01期 v.14;No.52 44-49页 [查看摘要][在线阅读][下载 540K] [下载次数：451 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 张丽丽;朱珊;刘瑛;刘梅冬;涂自智;刘可;邓恭华;
热休克反应是机体中一个重要的内源性保护机制,但其对TNF-α诱导的单核/巨噬细胞迁移有无影响目前尚不清楚.采用酶联免疫吸附实验观察TNF-α(20μg/L)刺激RAW264.7巨噬细胞4h后炎症因子IL-1β、IL-6、IL-15的表达情况;Western blot验证热休克预处理诱导热休克蛋白表达的增加;利用细胞趋化实验观察热休克预处理(42℃,1h)对TNF-α所致巨噬细胞迁移的影响.研究发现,TNF-α可明显促进RAW264.7细胞株中IL-1β、IL-6、IL-15等炎症因子的释放;热休克预处理诱导热休克蛋白HSP70、HSP90、HSP25表达增加;细胞趋化实验发现TNF-α处理的RAW264.7细胞迁移能力较正常对照组明显增强,而热休克预处理组巨噬细胞的迁移能力较单纯TNF-α处理组明显减弱.上述结果表明,热休克预处理抑制TNF-α所致巨噬细胞的迁移.
2010年01期 v.14;No.52 50-53页 [查看摘要][在线阅读][下载 208K] [下载次数：331 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 赵静;李艳萍;刘冬娥;刘能辉;陈仙花;姚仲元;张叶青;周世敏;
回顾性分析体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的686个周期,比较多原核受精组(348例)和非多原核受精组(338例)两组的一般资料、HCG日雌孕激素、获卵数、授精密度及活力、受精率、卵裂率、妊娠率.结果显示两组HCG日雌孕激素、获卵数、成熟卵率、受精率、卵裂率、妊娠率之间有显著差异(P<0.05),授精密度、受精活力之间无差异.表明HCG日雌孕激素较高,获卵数多及未成熟和过熟卵子比例高,预示着发生多原核受精的可能性大,而多原核受精的发生可能有较好的临床结局.
2010年01期 v.14;No.52 54-56页 [查看摘要][在线阅读][下载 135K] [下载次数：341 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：1 ] - 谢平丽;李官成;李艳东;周国华;李跃辉;郭锋杰;王甲甲;
采用体外致敏法和EBV转化技术联合噬菌体展示技术构建噬菌体呈现型单链抗体库.从中筛选获得阳性克隆,并进行ELISA、免疫组化及测序鉴定.结果得到了库容为4.0×109的初级噬菌体抗体库,全长ScFv(Single-chain Fv)基因的插入率为90%.筛选获得两个克隆对HT-29呈强阳性反应,而与HFF等人正常细胞系呈弱阳性或阴性反应.免疫组织化学鉴定表明克隆F12与结肠癌组织和结肠癌旁组织阳性率的差别有统计学意义.由上述结果可见构建库容量达4.0×109的全人源抗结肠癌噬菌体单链抗体库是完全可行的,经筛选及鉴定获得了特异性较强的噬菌体克隆,为结肠癌的临床导向诊断和治疗奠定了基础.
2010年01期 v.14;No.52 57-61页 [查看摘要][在线阅读][下载 458K] [下载次数：200 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：1 ] - 王学虎;傅仲学;赵渝;谌伟;吴星烨;
利用RT-PCR发现结肠癌细胞存在血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)的表达,随后采用外源性VEGF对结肠癌细胞SW480进行体外刺激,流式细胞仪检测到结肠癌细胞刺激后快速进入分裂期,同时提取VEGF作用前后的结肠癌细胞总蛋白,蛋白质组学研究,发现存在明显的蛋白质变化,其中鉴定出10个差异蛋白质.提示外源性VEGF可以促进结肠癌细胞增殖并对肿瘤细胞蛋白质组产生明显的影响.
2010年01期 v.14;No.52 62-66页 [查看摘要][在线阅读][下载 413K] [下载次数：90 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 陈志;易向军;张俊;徐孟亮;陈良碧;
为探讨茶陵野生稻苗期耐冷的生理机制,以耐冷性强弱不同的栽培稻及东乡野生稻为对照,研究了茶陵野生稻苗期冷胁迫后抗氧化系统的变化.结果表明,茶陵野生稻经冷胁迫后,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性以及抗坏血酸(AsA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量增加幅度大于冷敏感对照,而稍小于或相当于耐冷对照;超氧阴离子(O2)产生速率和丙二醛(MDA)含量低于冷敏感对照品种,而稍高于或相当于耐冷对照.说明茶陵野生稻苗期耐冷性与其抗氧化系统冷胁迫后的适应性变化密切相关.
2010年01期 v.14;No.52 67-72页 [查看摘要][在线阅读][下载 836K] [下载次数：216 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：15 ] |[阅读次数：1 ]
- 曾英;蒋星军;李贵妃;任彩萍;
MicroRNAs(miRNAs)是一种大小约20～25个碱基的非编码小分子RNA,一般通过特异性抑制靶蛋白翻译或降解靶基因mRNA发挥负调控基因表达的作用.胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES细胞)是从植入前早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞中分离得到并能在体外长期培养的高度未分化的多能细胞系,在揭示胚胎早期发育机理、药物筛选、临床再生医学等领域具有广泛的应用前景.最近研究发现miRNAs在ES细胞自我更新和分化过程中均发挥着重要的调控作用,但具体调控机制尚未完全阐明.进一步深入研究miRNAs在ES细胞中的作用,全面了解ES细胞自我更新和定向分化的机制是实现ES细胞广阔临床应用前景的基础.
2010年01期 v.14;No.52 73-79页 [查看摘要][在线阅读][下载 284K] [下载次数：331 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 项荣;谭志平;林云婷;江琛;
RTN3是RTN家族的成员之一,因其主要定位于内质网,所以用reticulon来命名.RTN3与RTN4B是RTN家族中目前已知的、唯一一对具有凋亡诱发功能的基因.过表达的RTN3介导了真核细胞的三大凋亡信号转导通路:死亡受体途径、线粒体途径、内质网途径,并使之交联形成凋亡调控网络;RTN3可与RTN4B相互作用,形成同源或异源二聚来调控细胞凋亡.另外,过表达RTN3还参与了细菌的类凋亡作用.RTN3广泛表达于多种组织,其过表达诱发凋亡的机制的总结将让人们更好的了解RTN3及其家族,完善细胞凋亡的信号转导研究.
2010年01期 v.14;No.52 80-84页 [查看摘要][在线阅读][下载 175K] [下载次数：262 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 张继红;邓克勤;汪启明;向丰;郭新红;唐冬英;刘选明;
植物具备一套复杂的由两种蓝光受体和多种信号转导下游组分组成的蓝光感应系统,通过感受光照强度、光的方向和光周期,调节自身对蓝光的应答.蓝光反应的有效波长是蓝光和近紫外光(320～400nm),故蓝光受体也叫蓝光/近紫外光受体.CRY2(Cryptochromes,CRY)是一个核蛋白,在转录水平受蓝光的调节,它的作用是增加拟南芥对蓝光的敏感性.植物蓝光调节的反应主要有向光性、抑制幼茎伸长、叶绿体迁移、刺激气孔张开和调节基因表达等.对植物蓝光反应突变体分子生物学研究进展进行了综述,对蓝光受体及信号转导下游组分在植物发育中的作用及蓝光诱发植物作出反应的分子机制进行了探讨.
2010年01期 v.14;No.52 85-89页 [查看摘要][在线阅读][下载 315K] [下载次数：627 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 陈雅斌;兰小鹏;
表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(Surface-enhanced laser desorption/ionization-time of flight,SELDI-TOF-MS)技术是目前蛋白质组学研究较为有效的手段之一,已被广泛的应用于肿瘤、传染性疾病、心血管病和神经系统等疾病的研究.然而SELDI-TOF-MS技术本身存在着一些问题,如分析结果有效性差和实验重复验证率低等,使其不能完全的应用于常规的临床诊断,现有许多研究致力于解决这些问题,如规范化实验室操作、预处理原始标本和数据、提高统计学方法等极大的改善和优化了这项技术.
2010年01期 v.14;No.52 90-94页 [查看摘要][在线阅读][下载 180K] [下载次数：153 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ]