- 陈念;赖小平;
参照近缘物种的线粒体基因序列设计并筛选得到8对引物,结合TA克隆和步移测序获得了全长17227bp的短尾蝮蛇线粒体基因组全序列.与多数蛇类线粒体基因组类似,其共编码包括13个蛋白、2个rRNA和22个tRNA在内的37个基因,另外还包含2个非编码的富含AT的控制区.基因间排列紧凑,多数基因间间隔极短甚至发生重叠.除nad1、cox1和nad3外,多数蛋白编码基因均以ATG作为起始密码子,终止密码子的使用则存在TAA、AGA、AGG和不完全的T4种情况.基于合并的19个tRNA基因序列组合数据采用NJ、MP和ME3种算法对21种蛇进行了初步的系统发育分析,结果表明,各主要分类单元之间的亲缘关系与前人基于形态学、线粒体12SrRNA和cytb基因序列研究的结论完全一致,这证实了基于合并的线粒体tRNA基因序列进行蛇类物种DNA分子系统学研究的可行性.
2010年03期 v.14;No.54 189-194页 [查看摘要][在线阅读][下载 338K] [下载次数：251 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 张艳阳;唐旻;夏琼;李冉林;邓志伟;彭向文;袁婺洲;吴秀山;
果蝇心脏一直以来都是研究心血管发育的极好模型,许多控制心脏分化和特化的调控基因和信号途径从果蝇到哺乳动物都是保守的.由于近年心力衰竭的发病率不断升高,我们最近又建立了果蝇心力衰竭模型用于大规模筛选和鉴定心力衰竭的相关基因.在这个模型中,适龄的成体果蝇被整齐排列在导电的载玻片上,通过电极短暂刺激30s,使果蝇的心跳频率由正常的3Hz增加到6Hz,停止后检测果蝇心率恢复情况,不能恢复正常心跳频率或出现纤维性震颤的果蝇视为心力衰竭.该模型可以在短期内大规模筛选到与心力衰竭相关的基因.利用此心力衰竭模型,我们筛选了164个果蝇2号染色体缺失系,获得33个候选缺失系.这些候选缺失系的心衰率要么与野生型品系相比差异显著,要么与tinman或panier突变系相比差异显著,提示这些缺失系中可能含有与心力衰竭相关的调控基因.
2010年03期 v.14;No.54 195-198页 [查看摘要][在线阅读][下载 171K] [下载次数：236 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] |[阅读次数：1 ] - 陈锋菊;谭树华;黄凤玲;贺玲;
从南北极环境土样中筛选到1株产脂肪酶细菌7342,16SrDNA序列分析表明该菌株属于Psychrobacter sp..p-NPP法研究显示,菌株7342所产粗酶液的最适温度为30℃、最适pH值为8.0,对热较稳定;Co2+和Cs+对粗酶液有激活作用,而Na+、Sr2+等7种金属离子对其均有不同程度的抑制作用;粗酶液能在高浓度的SDS、Tween20等变性剂中表现出较好的稳定性.
2010年03期 v.14;No.54 199-202页 [查看摘要][在线阅读][下载 200K] [下载次数：234 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：1 ] - 廖刚;王子卫;赵林;张能;董浦江;
通过定向克隆法构建真核表达载体pEGFPN1-DNEGFR,脂质体介导下转染体外培养的SGC-7901细胞,应用Western blotting检测DNEGFR-EGFP蛋白的表达,激光共聚焦显微镜对DNEGFR-EGFP亚细胞结构定位检测;并经RT-PCR、Western blotting检测DNEGFR-EGFP对内源性EGFRmRNA水平、蛋白及磷酸化水平的影响.成功检测到DNEGFR-EGFP蛋白的表达,DNEGFR-EGFP蛋白主要定位于细胞膜,DNEGFR-EGFP能降低内源性EGFR蛋白磷酸化水平,而对内源性EGFRmRNA水平及蛋白水平无影响.研究证明DNEGFR通过降低内源性EGFR蛋白磷酸化水平负调控EGFR功能,为靶向EGFR显性负性策略在肿瘤生物治疗中的进一步研究打下基础.
2010年03期 v.14;No.54 203-207+239页 [查看摘要][在线阅读][下载 306K] [下载次数：112 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：1 ] - 张少平;陈亮;郭勇;
豆豉纤溶酶是从豆豉中发现的新型纤溶酶.从枯草杆菌DC-12中提取总DNA,PCR法扩增pro-DFE基因.将pro-DFE基因插入载体pET-32a,构建表达质粒pET-pro-DFE,转化大肠杆菌BL21(DE3),对重组菌株进行变温诱导表达,重组菌株于37℃培养至OD600为0.6时,加入终浓度为0.4mmol/L的IPTG于24℃进行诱导,SDS-PAGE显示可溶性重组融合蛋白约占重组蛋白的60%.且少量融合重组蛋白发生自切割,形成成熟的豆豉纤溶酶,破菌上清中含有成熟的豆豉溶栓酶,纤溶活性为200IU/mL.重组酶经纯化后比酶活为1280IU/mg.
2010年03期 v.14;No.54 208-212页 [查看摘要][在线阅读][下载 259K] [下载次数：146 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 欧阳东云;徐丽慧;高琦;郭贺;陈清;何贤辉;
中性氨基酸转运蛋白(ASCT2)是人类内源性病毒的包膜蛋白合胞素在细胞膜上的主要受体,ECL2是该受体的其中一个较大的胞外结构域.通过RT-PCR方法从人乳腺癌MCF-7细胞中克隆ASCT2基因编码区全长序列,再从中扩增ASCT2的胞外区ECL2序列,与pET-41b连接构建原核表达载体,重组质粒在大肠杆菌中获得高效表达,重组蛋白在N-和C-端分别融合谷胱甘肽转移酶(GST)和His6标签,融合蛋白在上清液和包涵体中均有表达,可溶性部分经亲和层析纯化获得高纯度的重组蛋白,该蛋白可结合在表达合胞素的MCF-7细胞表面,具有结合合胞素的潜在活性,这些结果为进一步研究ASCT2与合胞素的相互作用奠定了基础.
2010年03期 v.14;No.54 213-218页 [查看摘要][在线阅读][下载 301K] [下载次数：90 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 罗伯祥;肖自友;邓力华;陈芬;陈受宜;李文彬;肖国樱;
胆碱单加氧酶(Choline monooxygenase,CMO)是高等植物体内合成甜菜碱的一个关键酶.利用载体pCAMBIA3300与玉米泛素(Ubiquitin)启动子构建了AhCMO基因的过表达载体.采用基因枪轰击愈伤组织细胞将AhCMO基因转化东稻3号(OryzasativaL.subsp.japonica Kato),经抗性筛选,获得再生苗18株,选取农艺性状与野生型基本一致的其中7株进行PCR与Southern杂交检测,获得3株转AhCMO基因阳性植株;RT-PCR的检测结果表明外源AhCMO基因能正常转录;草铵膦叶片涂布试验结果表明,Bar基因在转AhCMO基因水稻植株中能正常表达;对T1代转基因再生植株进行0.5%NaCl高盐处理,结果表明,4号、7号转AhCMO基因水稻耐盐性强于非转基因对照,说明外源AhCMO基因能提高东稻3号的耐盐性.
2010年03期 v.14;No.54 219-225+245页 [查看摘要][在线阅读][下载 604K] [下载次数：204 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：1 ] - 李会东;彭智辉;康健;张大为;王能强;周建红;
以根霉RhizopusLH2死菌体为吸附剂进行水体中六价铬的吸附研究.结果表明,Cr(VI)的生物吸附最优条件为:温度28℃,pH为2;线性回归相关系数为0.98,符合Langmuir吸附等温线模型;傅立叶红外变换光谱分析推断吸附机理为质子化氨基在Cr(VI)的生物吸附中起主要作用.
2010年03期 v.14;No.54 226-229页 [查看摘要][在线阅读][下载 222K] [下载次数：268 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：12 ] |[阅读次数：1 ] - 孙秋妍;陈珮珮;刘应迪;
通过野外调查、查阅标本及相关资料,对湖南伞形科植物进行了研究,确认湖南现有伞形科植物3亚科26属65种6变种2变型,种类较为丰富,其中湖南新纪录种6种.湖南伞形科区系温带性质占主体,其区系与江西、贵州、湖北的区系关系密切;湘西北地区伞形科植物最为丰富,湘西北至湘西南地区为湖南伞形科植物的分布中心.伞形科植物有很大的经济价值,应采取措施对其资源保护和可持续利用.
2010年03期 v.14;No.54 230-235页 [查看摘要][在线阅读][下载 220K] [下载次数：311 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：1 ] - 宫霞;乐国伟;
研究了家蝇幼虫抗菌肽MDL-3的荧光光谱和淬灭剂对内源性荧光的影响.家蝇幼虫抗菌肽MDL-3在280nm波长的激发光时,荧光光谱为Tyr残基和Trp残基共同提供,KI不能淬灭抗菌肽MDL-3的Trp残基的荧光,而Acr只能淬灭71%(f=0.71)的抗菌肽MDL-3中的Trp残基的荧光,说明Trp残基不是位于抗菌肽分子的表面,而是位于分子的内部.
2010年03期 v.14;No.54 236-239页 [查看摘要][在线阅读][下载 188K] [下载次数：134 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 邹义洲;秦志强;罗奇志;霍治;余平;
MICA系MHC-I类相关多态性基因A,其表达细胞膜蛋白质分子与器官移植免疫排斥有关.新生儿脐带静脉血管内皮细胞(HUVEC)被分离和培养至4～6代.11例新分离培养的HUVEC和7种人细胞株的MICAmRNA转录水平用RT-PCR检测,应用细胞流式检测细胞膜表面的MICA分子的表达情况,同时应用免疫印迹的方法对整个细胞MICA蛋白质的表达水平进行检测和分析.结果显示MICAmRNA在所有检测细胞中有表达,HUVEC细胞膜或胞浆中MICA蛋白质表达量很高,而在人体淋巴细胞膜表面和胞内未检出MICA分子的表达.提示HUVEC和淋巴细胞在MICA表达的差异性可能与不同细胞的内部调节机制有关.而供体器官血管内皮细胞表达多态性MICA分子有可能成为移植抗原发生免疫排斥反应.
2010年03期 v.14;No.54 240-245页 [查看摘要][在线阅读][下载 379K] [下载次数：195 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：2 ] - 吴帅;张才全;赵林;林传彬;汤为学;
探讨结直肠癌中B细胞淋巴瘤因子9(B-cell lymphoma 9,BCL9)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达与临床病理的关系及其临床意义.采用免疫组织化学SABC染色法,检测83例结直肠癌组织和10例癌旁正常组织中BCL9及VEGF蛋白的表达情况,并且分析其与临床病理特征的关系.BCL9和VEGF在癌组织中表达率分别为67.47%(56/83)和69.88%(58/83),而癌旁正常组织中均不表达.BCL9在结直肠癌中的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、Dukes分期、有无淋巴结转移相关(P<0.05).VEGF在结直肠癌中的表达与肿瘤分化程度、浸润深度无关,而与肿瘤Dukes分期、有无淋巴结转移密切相关(P<0.01).结直肠癌中VEGF的表达随BCL9表达的升高而升高(P<0.01).BCL9、VEGF可能在结肠癌的发生发展过程中起重要作用.BCL9可能通过上调VEGF的表达,促进肿瘤浸润和转移.
2010年03期 v.14;No.54 246-249页 [查看摘要][在线阅读][下载 271K] [下载次数：190 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：1 ] - 吴丽莎;蒋星军;刘卫东;周文;冯湘玲;李雪华;祝斌;王磊;刘春梅;姚开泰;任彩萍;
利用我室建立的原位鼻咽癌裸鼠模型,建立了稳定性较好的鼻咽癌裸鼠血清蛋白质2-DE方法,并比较了原位鼻咽癌裸鼠血清与对照组裸鼠血清蛋白质2-DE图谱之间的差异.与正常裸鼠血清比较,原位鼻咽癌裸鼠模型组血清增加了4个蛋白质点.利用MALDI-TOF质谱技术对血清差异蛋白点进行鉴定,发现SAA-1前体(serumamyloidA-1 protein precursor)在鼻咽癌裸鼠模型组血清中明显高表达,为寻找鼻咽癌血清生物标志物提供了有利的线索.
2010年03期 v.14;No.54 250-256页 [查看摘要][在线阅读][下载 335K] [下载次数：205 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ]